携带小鼠信号转导子及转录激活子3重组慢病毒载体的构建与鉴定

• 作者: 张扬 杨华安 杨钰兴 胡溯 苟欣
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 信号转导子及转录激活子 3 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2015,（27）
• 所属期刊栏目: ? 技术与方法 ?
• 页码范围: 3803-3804,3807
• 页数: 3页
• 分类号: R392.4
• 字数: 2312字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2015.27.018

摘要

目的：构建携带小鼠信号转导子及转录激活子3(STAT3)的重组慢病毒载体,并检测 STAT3的蛋白表达,进行慢病毒包装并鉴定。方法将小鼠成肌细胞总 RNA 通过 STAT3引物逆转录为 cDNA PCR 扩增、回收后,同 pLVX-IRES-Zs-Green1载体片段连接,酶切鉴定及测序,将 pLVX-IRES-ZsGreen1-STAT3转染293 T 细胞,48 h 后收集细胞,Western blot 检测STAT3表达量,通过瞬时转染法包装出病毒上清。结果测序结果证实 STAT3成功插入 pLVX-IRES-ZsGreen1慢病毒载体,成功构建了慢病毒载体 pLVX-IRES-ZsGreen1-STAT3,共转染293 T 细胞48 h,Western blot 检测 STAT3表达量明显增强。测定病毒滴度为8.4×107 TU/mL。结论成功构建了 STAT3基因的重组慢病毒表达载体,为进一步应用奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苟欣	重庆医科大学附属第一医院泌尿外科	194	861	13.0	19.0
2	杨华安	重庆市渝北区人民医院泌尿外科	8	10	2.0	2.0
3	张扬	重庆市渝北区人民医院泌尿外科	2	0	0.0	0.0
4	杨钰兴	重庆市渝北区人民医院泌尿外科	4	2	1.0	1.0
5	胡溯	重庆市渝北区人民医院泌尿外科	2	2	1.0	1.0