小鼠miR-122重组慢病毒载体的构建和鉴定

• 作者: 唐晶 李治熹 谢平 邓小耿 邱荣林
• 来源期刊: 岭南现代临床外科
• 学科: 生物学
• 关键词: MicroRNA-122 载体构建 慢病毒
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 92-95,102
• 分类号: Q987.1
• 字数: 3626字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-976X.2012.02.003

摘要

目的 构建携带miR-122的重组慢病毒表达载体,为研究miR-122的功能和作用机制奠定基础.方法 从小鼠基因组DNA采用PCR法扩增出pre-miR-122基因,测序后克隆至pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP逆转录病毒载体上,测序鉴定,病毒包装后,转染NIH3T3细胞,并通过绿色荧光蛋白进行病毒滴度测定.将重组慢病毒感染肝前体细胞(HPCs),利用实时定量PCR检测miR-122的表达.结果 重组慢病毒载体pCDH-CMV-miR-122-EF1-copGFP经PCR扩增及测序鉴定正确,并得到了滴度为(1-5)×106 IU/mL的病毒液.pCDH-CMV-miR-122-EF1-copGFP感染的肝前体细胞中miR-122表达显著增强.结论 成功构建了小鼠miR-122重组慢病毒,并在肝前体细胞中高效表达出miR-122,为进行miR-122的功能和机理奠定了良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邓小耿	中山大学孙逸仙纪念医院小儿外科	23	67	5.0	6.0
2	邱荣林	中山大学孙逸仙纪念医院小儿外科	7	15	3.0	3.0
3	谢平	中山大学孙逸仙纪念医院小儿外科	5	101	4.0	5.0
4	唐晶	中山大学孙逸仙纪念医院小儿外科	4	4	1.0	2.0
5	李治熹	中山大学孙逸仙纪念医院小儿外科	2	4	1.0	2.0