小鼠IL-10重组慢病毒载体的构建和病毒包装

• 作者: 温桂兰 许飞 陈亮
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: IL-10基因 慢病毒载体 免疫耐受
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 540-544
• 分类号: R392.12
• 字数: 3935字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2011.06.014

摘要

目的:构建小鼠IL-10重组慢病毒表达载体并进行包装,为进一步研究IL-10基因修饰树突细胞在哮喘免疫耐受中的作用提供实验基础.方法:小鼠IL-10基因片段经PCR扩增后,与酶切线性化的慢病毒载体进行定向连接,获得PGC-LV-IL-10重组慢病毒并转化细菌感受态细胞.克隆菌落行PCR鉴定,对阳性的重组质粒进行测序并转入293T细胞,荧光显微镜下观察GFP表达并行Western blot鉴定.将重组质粒与慢病毒包装系统一同转染293T细胞进行病毒包装,Real-time定量PCR法检测病毒滴度.结果:DNA测序结果及Western blot鉴定证实成功构建小鼠IL-10重组慢病毒载体,对其进行包装后测定慢病毒滴度为2×108 TU/ml.结论:成功构建并包装小鼠IL-10重组慢病毒表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈亮	南昌大学第一附属医院呼吸内科	10	41	4.0	6.0
2	许飞	南昌大学第一附属医院呼吸内科	50	178	8.0	9.0
3	温桂兰	南昌大学第一附属医院呼吸内科	26	102	6.0	8.0