PPARγ及其辅激活子 MED1重组腺病毒的制备与生物学功能分析

• 作者: REDDY Janardan K 刘恩岐 李倩薇 白亮 贾玉枝 赵四海
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: PPARγ MED1 重组腺病毒 CsCl 梯度离心
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 294-298
• 页数: 5页
• 分类号: Q812
• 语种: 中文
• DOI: 10.7652/jdyxb201503002

摘要

目的：制备大量 PPARγ与 MED1腺病毒,探讨其生物学功能。方法以实验室现有的腺病毒原液为材料,用HEK293a 细胞包装腺病毒,CsCl 梯度离心法纯化病毒,A260法测定病毒颗粒,并通过细胞感染、小鼠活体尾静脉注射病毒等实验,用 HE 染色法、Real-time PCR 及免疫组化法进一步鉴定病毒的生物学功能。结果获得 Ad/LacZ、Ad/PPARγ和 Ad/MED1,其浓度分别为2.51×1012、1.57×1012、2.59×1012 VP/mL。C57BL/6J 小鼠经尾静脉注射 Ad/PPARγ,小鼠出现脂肪肝,肝细胞聚集大量脂滴,且 PPARγ mRNA 和蛋白表达显著增加。同样,用 Ad/MED1感染3T3-L1细胞或给小鼠尾静脉注射 Ad/MED1,MED1表达水平都显著升高。结论 Ad/PPARγ、Ad/MED1及对照Ad/LacZ 成功制备,为体外细胞病毒感染以及活体研究 PPARγ与 MED1的基因功能以及网络调控奠定了实验基础。