AZIN1慢病毒的制备及 EC109稳定感染细胞株的建立

• 作者: 常志伟 秦艳茹 贾永旭 陈竞红
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: AZIN1基因 RNA编辑 慢病毒 EC109细胞
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 食管癌研究
• 页码范围: 561-564
• 页数: 4页
• 分类号: R735.1
• 字数: 2951字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13705/j.issn.1671-6825.2016.05.001

摘要

目的：制备野生型和编辑型AZIN1的慢病毒并建立稳定感染的食管癌EC109细胞株。方法：用RT-PCR法从人食管鳞状细胞癌组织中扩增出AZIN1基因的cDNA序列，选取测序结果中目标位点的A峰与G峰均高且与NCBI公布的基因编码序列一致的PCR产物，克隆至慢病毒表达载体pLenti6／V5-D-TOPO，构建野生型和编辑型AZIN1的重组慢病毒表达载体，经酶切和测序鉴定后，经293 FT细胞包装，制备相应的慢病毒，然后感染EC109细胞株，行RT-PCR、测序和Western blot鉴定稳定感染的EC109细胞株。结果：双酶切重组慢病毒表达载体后产生了1347 bp和6915 bp的片段，经测序证实1347 bp片段为正确的AZIN1基因编码序列；RT-PCR、测序和Western blot结果证实成功建立了稳定感染的EC109细胞株。结论：成功制备了野生型和编辑型AZIN1的慢病毒并建立了稳定感染的EC109细胞株。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦艳茹	郑州大学第一附属医院肿瘤科	77	281	8.0	13.0
2	常志伟	郑州大学第一附属医院肿瘤科	28	131	6.0	10.0
3	陈竞红	郑州大学第一附属医院肿瘤科	2	2	1.0	1.0
4	贾永旭	郑州大学第一附属医院肿瘤科	22	139	8.0	11.0