腺相关病毒介导的狨猴 P53基因沉默

• 作者: 刘云波 向志光 张晨 石亮 苏静芬 邓仪晨
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: AAV8 P53 RNA干扰 狨猴
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 53-57
• 页数: 5页
• 分类号: R-33
• 字数: 2956字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2016.04.009

摘要

目的：在细胞和整体动物水平，利用RNA干扰技术下调绒猴p53基因表达。方法对狨猴p53基因做生物信息学分析，针对靶序列设计shRNA干扰序列，构建在腺相关病毒载体上，转染非洲绿猴肾细胞（ cos-7），在细胞水平用荧光定量PCR检测p53mRNA抑制效果，以Western blot 方法检测p53蛋白水平表达变化；优选shRNA干扰序列，包装含shRNA干扰序列的8型腺相关病毒，静脉注射感染狨猴；手术取少量肝脏组织，用Western blot和免疫组化方法检测p53蛋白水平的变化。结果细胞水平研究发现2个有效RNA干扰靶点，mRNA干扰效率分别为（82.7±8.1）％和（80.7±7.5）％（P＜0.05）；蛋白表达下调（77.3±11.5）％和（73.7±10.7）％（P＜0.05）；2只绒猴感染病毒后，经活体荧光成像分析可见病毒在肝脏、睾丸、颈部等位置分布，狨猴肝脏P53蛋白经Western blot、免疫组化分析未见明显变化。结论本研究在细胞水平实现绒猴P53基因表达下调，但整体动物水平狨猴肝脏P53蛋白表达未发现明显变化；今后需在感染方式等方面做进一步优化。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘云波	中国医学科学院医学实验动物研究所	45	391	9.0	19.0
2	张晨	北京大学生命科学学院	34	56	4.0	7.0
3	向志光	中国医学科学院医学实验动物研究所	25	50	4.0	5.0
4	苏静芬	中国医学科学院医学实验动物研究所	3	6	2.0	2.0
5	石亮	中国医学科学院医学实验动物研究所	3	8	2.0	2.0
6	邓仪晨	中国医学科学院医学实验动物研究所	1	2	1.0	1.0