风疹病毒多表位诊断抗原的制备与评价

• 作者: 伊瑶 卢学新 孟庆玲 毕胜利 田瑞光 苏秋东 贾志远 邱丰 郭敏卓
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 多表位抗原 风疹病毒 原核表达 层析纯化 GST标签
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 249-255
• 页数: 7页
• 分类号: R373.9
• 语种: 中文

摘要

原核表达与层析纯化获取风疹病毒(Rubella Virus,RV)多表位诊断抗原,并初步评价其抗原性.将RV衣壳蛋白C aa 3～29、aa 96～123以及包膜糖蛋白E1 aa208～247三个主要免疫显性表位串联,密码子优化后全基因合成;利用基因重组技术将多表位串联片段插入带有GST标签的表达质粒中,在大肠杆菌中进行表达,并利用亲和层析和离子交换层析纯化目的蛋白;利用Western Blot(WB)技术对目的蛋白抗原性进行鉴定,并建立RV-IgM抗体检测ELISA技术,初步评价此方法对阴阳血清样本的鉴别能力.获取高度均质的RV多表位诊断抗原,WB实验表明目的蛋白不但可以被anti-GST单克隆抗体识别,还可以被anti-RV多克隆抗体、RV-IgM阳性血清相应抗体所识别.分别对48份RV急性感染病例的阳性血清、阴性血清和健康人血清进行检测,发现一致性优异.原核表达与层析纯化可以获取抗原性良好的RV多表位诊断抗原,偶联HRP后可以作为检测抗原应用于RV-IgMELISA血清学检测中.