风疹病毒E1抗原特异性片段在酵母系统中重组表达及应用

• 作者: 张守柱 李秀义 温和 潘继文 高冬梅
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 风疹病毒 E1蛋白 酵母表达
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1210-1214
• 页数: 5页
• 分类号: R392-33
• 字数: 4127字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.08.009

摘要

目的 利用真核系统对E1蛋白进行表达并纯化,建立一种以重组E1蛋白为包被抗原的风疹病毒抗体ELISA检测方法.方法 通过生物信息学预测E1优势抗原表位,根据真核系统表达的特点进行序列优化,全基因合成获得风疹病毒E1优势片段核酸序列,构建真核表达载体,在真核系统内进行诱导表达并纯化,用Western blot证实E1蛋白的抗原性.建立ELISA检测系统,并初步检测100份临床血清标本.结果 SDS-PAGE证实重组E1蛋白在酵母中高表达,Western blot证实该E1蛋白具有良好的抗原性,成功建立了检测IgM间接ELISA方法,对临床血清标本的初步检测显示该试剂盒具有较好的敏感性和特异性.结论 本ELISA检测试剂有较高敏感性和较强的特异性,可进一步开发用于检测风疹病毒的早期感染的试剂盒.