白念珠菌RAS1基因高表达菌株的构建及鉴定

• 作者: 夏金萍 章珍珍 马鸣 魏昕
• 来源期刊: 口腔生物医学
• 学科: 医学
• 关键词: 白念珠菌 RAS1基因 高表达
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 72-75
• 页数: 4页
• 分类号: R780.2
• 字数: 3796字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8603.2016.02.004

摘要

目的：构建白念珠菌RAS1基因高表达菌株pCaEXP?RAS1?CAI4。方法：将白念珠菌RAS1基因的开放阅读框（ ORF）置于高表达载体pCaEXP的启动子MET3之后，构建高表达质粒载体pCaEXP?RAS1。将整合的重组质粒转化进入大肠杆菌DH5α，经扩增后采用质粒抽提试剂盒大量制备pCaEXP?RAS1质粒。单酶切线性化质粒，将线性化的pCaEXP?RAS1经醋酸锂法转化入白念珠菌CAI4细胞内，随后在SD?ura?met?cys选择性培养基获得转化子，构建pCaEXP?RAS1?CAI4菌株。挑取单克隆菌落，经菌落PCR验证阳性转化子，并采用实时定量PCR检验RAS1基因在pCaEXP?RAS1?CAI4菌株的表达水平。结果：酶切及测序鉴定表明高表达质粒载体pCaEXP?RAS1构建成功，实时定量PCR检验转化子RAS1基因在pCaEXP?RAS1?CAI4菌株的表达水平，表明pCaEXP?RAS1?CAI4菌株构建成功。结论：通过高表达质粒载体pCaEXP?RAS1可以成功构建pCaEXP?RAS1?CAI4菌株。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏昕	南京医科大学口腔疾病研究江苏省重点实验室	19	63	4.0	6.0
5	马鸣	南京医科大学口腔疾病研究江苏省重点实验室	9	27	4.0	5.0
9	章珍珍	南京医科大学口腔疾病研究江苏省重点实验室	2	10	2.0	2.0
13	夏金萍	南京医科大学口腔疾病研究江苏省重点实验室	2	10	2.0	2.0