5-Aza对CDH1启动子甲基化及舌鳞状细胞癌细胞迁移能力的影响

• 作者: 侯劲松 刘习强 王成 蔡伟鑫 陈小华 马辉彬 黄洪章
• 来源期刊: 中华口腔医学研究杂志（电子版）
• 关键词: 舌 癌,鳞状细胞 迁移 甲基化 E钙粘着糖蛋白 上皮细胞-间质细胞转换
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 155-160
• 页数: 6页
• 字数: 4507字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-1366.2016.03.001

摘要

目的：探讨甲基化抑制剂5-氮杂胞苷（5?Aza）对CDH1启动子甲基化状态及舌鳞状细胞癌（TSCC）细胞侵袭迁移的影响。方法5?Aza处理TSCC细胞株UM1和UM2，倒置相差显微镜下观察处理前后细胞形态及排列情况；划痕试验和Transwell试验检测处理前后细胞迁移和侵袭能力；Western blot法和免疫荧光检测E?cadherin表达；甲基化特异PCR（MSP）检测处理前后UM1、UM2细胞E?cadherin编码基因CDH1的甲基化状态。细胞相对侵袭率的比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。结果 UM1细胞呈小圆形、多边形或梭形，细胞排列松散，未见明显的细胞间的紧密连接；UM2细胞则表现为多边形，细胞与细胞之间紧密接触，呈典型的“铺路石”样排列。UM1细胞E?cadherin表达较UM2低，细胞划痕经过48 h后完全铺满，而UM2细胞划痕48 h后不足75%。加入去甲基化药物5?Aza后，UM1细胞形态稍不规则，以多边、多角形细胞为主，且出现类似UM2细胞的铺路石样排列的细胞团，可见细胞间的紧密连接，细胞划痕经过48 h后仍不足70%，细胞相对侵袭率为加药前的102%(χ2=0.651，P＞0.05)，E?cadherin表达上调。MSP结果显示，UM1细胞的E?cadherin编码基因CDH1的呈现过甲基化，去甲基化药物5?Aza作用后其甲基化程度降低。结论5?Aza可诱导E?cadherin编码基因CDH1去甲基化，导致E?cadherin上调抑制其迁移能力。