λRed重组系统用于沙门菌质粒毒力基因spvC敲除株的构建

• 作者: 储元元 吴淑燕 李嫄渊 燕婧 高嵩
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: λRed重组系统 沙门菌 spvC 基因敲除 质粒
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 开发与应用
• 页码范围: 367-371
• 页数: 5页
• 分类号: R378.22
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2016.04.0063

摘要

[目的]利用λRed重组系统敲除沙门菌质粒毒力基因spvC.[方法]首先以质粒pKD4为模板,扩增得到两侧含spvC同源臂、中间为卡那霉素抗性基因的线性DNA片段.再将此线性片段电转入具重组功能的感受态沙门菌菌株,发生重组后,卡那霉素平板筛选阳性转化子.最后利用表达FLP重组酶的质粒pCP20,将FRT位点之间的卡那霉素抗性基因消除,用PCR鉴定.Western Blot检测野生沙门菌和spvC敲除株感染的HeLa细胞ERK磷酸化水平.[结果]沙门菌质粒毒力基因spvC敲除株构建成功,spvC敲除株感染的HeLa细胞内ERK磷酸化水平升高.[结论]成功构建沙门菌质粒毒力基因spvC敲除株,验证了spvC基因的功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴淑燕		52	274	9.0	15.0
2	燕婧		3	0	0.0	0.0
3	李嫄渊		19	55	3.0	7.0
4	储元元		5	20	2.0	4.0
5	高嵩		2	0	0.0	0.0