猪流行性腹泻病毒间接ELISA检测方法的建立

• 作者: 于海 单同领 吴永光 孔宁 孟琼 左叶雯 李国新 童武 郑浩
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 间接ELISA 猪流行性腹泻病毒 截短S蛋白
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 病毒
• 页码范围: 7-12
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 3593字
• 语种: 中文

摘要

本研究获得5个猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV) S1基因截短基因,原核表达后制备多克隆抗体.酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、Western blot和间接免疫荧光检测(indirect immunofluorescence assay,IFA)显示,仅有SE蛋白诱导的多克隆抗体具有免疫活性.因此以SE蛋白为抗原建立间接ELISA抗体检测方法,优化各反应参数并确定临界值为0.155.经特异性和符合性分析,该ELISA检测方法具有PEDV特异性,符合率为93.7％.批内、批间重复率变异系数均小于10％,表明建立的iELISA方法重复性良好.抗S蛋白的ELISA检测方法的建立为PEDV血清学抗体检测和疫苗评估奠定了基础.