帕妥珠单抗在食蟹猴体内的药代动力学检测方法

• 作者: 任欣怡 刘运龙 张茂桃 李丽 杨越明 程远国 胡百卉 车津晶 陈知航
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 帕妥珠单抗 人表皮生长因子2 酶联免疫吸附法 药代动力学
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 233-236
• 页数: 4页
• 分类号: Q503|R392.1
• 字数: 2492字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2016.02.020

摘要

目的:建立一种灵敏度高、特异性好且快速的ELISA方法,用以检测食蟹猴体内的帕妥珠单抗含量.方法:采用双抗夹心的ELISA方法对帕妥珠单抗进行定量.以ErbB2单抗作为一抗,将其包被至96孔板上,加入待检样品,之后加入稀释好的二抗(猴血清吸附的羊抗人IgG-HRP),令结合到一抗上的帕妥珠单抗与其特异性结合,再加入底物进行显色,在酶标仪上用双波长读取D450/560nm值.结果:建立了室温稳定性、冻融稳定性、稀释效应稳定性良好的检测帕妥珠单抗的ELISA方法并得到确证,其定量下限为0.78 nm/mL,线性范围为0.78～50 nm/mL,板间及板内的准确度、精密度均在±15％之内.结论:该ELISA方法学的确证表明用该方法测定帕妥珠单抗浓度具有特异性好、灵敏度高、速度快的特点,能够满足新生物制药临床前药代动力学的指导要求,可应用于帕妥珠单抗的检测.