人β-淀粉样肽Aβ42的融合表达与纯化

• 作者: 吴骏 王利娟 陈庆梅
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 人β-淀粉样肽 Aβ42 GST表达系统 融合蛋白 亲和纯化
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 146-151
• 页数: 6页
• 分类号: Q816
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2016.02.0027

摘要

[目的]建立一种快速可靠、获取足量和高纯度的人β-淀粉样肽(Aβ2)的方法.[方法]首先利用重叠PCR技术扩增获得Aβ2基因全长.随后将基因连入pGEX-4T-1载体,利用GST系统表达融合蛋白.分别在16℃、25℃、30℃和37℃诱导表达,SDS-PAGE检测融合蛋白的表达情况,确定表达的最佳温度.根据优化条件进行目的蛋白的大量表达,利用Gstrap FF柱亲和纯化GST-Aβ42融合蛋白.[结果]成功构建pGEX/Aβ42表达载体,确定30℃为诱导表达的最佳温度.大量表达并经过纯化可获得分子量为30.7 kDa的融合蛋白.[结论]利用GST融合系统表达纯化可得到纯度超过90％的GST-Aβ42融合蛋白,重组蛋白的产率约为1.2 mg/L培养基.当用凝血酶切除GST融合标签后,Aβ42易聚集沉淀.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈庆梅		4	9	1.0	3.0
2	吴骏		6	1	1.0	1.0
3	王利娟		4	3	1.0	1.0