RNAi干扰Twist基因对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株增殖与侵袭力及E-钙黏蛋白甲基化的影响

• 作者: 孙志宏 齐莹
• 来源期刊: 中国耳鼻咽喉颅底外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 喉鳞状细胞癌 RNAi干扰 Twist基因 侵袭力
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 467-471
• 页数: 5页
• 分类号: R739.65
• 字数: 3923字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11798/j.issn.1007-1520.201606010

摘要

目的 探讨RNAi干扰Twist基因对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株增殖、侵袭力及E-钙黏蛋白甲基化的影响.方法 培养人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株,分别转染siRNA-Twist(siRNA-Twist组)、阳性对照siRNA-GAPDH(阳性对照组)和阴性对照错义链(阴性对照组),利用实时荧光定量PCR技术检测各转染组细胞中Twist和E-cad基因表达,Western blot法检测各转染组细胞中Twist和E-cad蛋白表达,MTT比色法检测各转染组细胞增殖情况,Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力,甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)检测不同转染组细胞中E-cad甲基化表达.结果 siRNA-Twist组细胞中Twist mRNA和Twist蛋白表达量均低于阳性对照组和阴性对照组,差异均具有统计学意义(P＜0.05);siRNA-Twist组细胞中E-cad mRNA和E-cad蛋白表达量均高于阳性对照组和阴性对照组,差异均具有统计学意义(P＜0.05);与阳性对照组和阴性对照组相比,siRNA-Twist组细胞转染48 h～96 h时细胞增殖能力明显减弱,差异均具有统计学意义(P＜0.05);siRNA-Twist组细胞迁移细胞数和侵袭细胞数均低于阳性对照组和阴性对照组,差异均具有统计学意义(P ＜0.05);MSP检测结果显示,siRNA-Twist组细胞中E-cad甲基化扩增条带呈弱阳性,表达强度显著低于阳性对照组和阴性对照组,而非甲基化扩增条带呈阳性.结论 特异性抑制Twist基因表达可能通过影响E-cad甲基化而上调E-cad表达,从而抑制细胞增殖及侵袭能力,有望为喉鳞状细胞癌基因治疗提供新的靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	齐莹	中国医科大学第四医院耳鼻咽喉科	32	45	4.0	6.0
2	孙志宏	平项山市第二人民医院耳鼻咽喉科	1	6	1.0	1.0