一种转葡萄糖苷酶基因的克隆表达及其生物催化合成α－熊果苷

• 作者: 张朝晖 王益栋 邵梦格 陈小龙 魏盼盼
• 来源期刊: 日用化学工业
• 学科: 工学
• 关键词: 化妆品添加剂 α-熊果苷 生物催化
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 开发与应用 KAIFA YU YINGYONG
• 页码范围: 467-472,478
• 页数: 7页
• 分类号: TQ658
• 字数: 4791字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13218/j.cnki.csdc.2016.08.009

摘要

通过一步法克隆试剂盒将来自野油菜黄单胞菌的转葡萄糖苷酶基因与表达载体pET28a同源重组，构建质粒pET28a-agl，并转化到不同感受态细胞中，筛选出高效表达转葡萄糖苷酶的基因工程菌E．coliBL21Gold（DE3）plysSpET28a-agl，以催化合成α-熊果苷。利用IMAC亲和层析，获得转葡萄糖苷酶用于其酶学性质的研究。催化合成α-熊果苷的较佳反应条件为：转葡萄糖苷酶的质量浓度0.2725g／L，对苯二酚质量浓度11g／L，麦芽糖浓度1.1mol／L，磷酸盐缓冲液浓度100mmol／L（pH＝6.5），30℃下摇床反应3h。研究发现，反应产物α-熊果苷对转葡萄糖苷酶反应有轻微的抑制作用；1mmol／LK＋对转葡萄糖苷酶的相对酶活有提高作用，1mmol／LCu2＋几乎能完全抑制该酶活性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张朝晖	浙江工业大学生物工程学院	62	616	13.0	22.0
2	陈小龙	浙江工业大学生物工程学院	55	411	11.0	18.0
3	魏盼盼	浙江工业大学生物工程学院	3	0	0.0	0.0
4	邵梦格	浙江工业大学生物工程学院	2	0	0.0	0.0
5	王益栋	浙江工业大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0