迟缓爱德华氏菌Eta1-L-Gapdh融合蛋白在蓝藻中的表达

• 作者: 张泽峰 王春梅 王晶晶 王智
• 来源期刊: 微生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 迟缓爱德华氏菌 eta1 gapdh 鱼腥藻PCC7120 三亲接合 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 78-84
• 页数: 7页
• 分类号: Q78
• 字数: 5376字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-7021.2016.05.014

摘要

在蓝藻中表达迟缓爱德华氏菌Eta1-L-Gapdh融合蛋白.提取迟缓爱德华氏菌基因组DNA为模板,用PCR技术分别扩增两个已知具有较强免疫原性的基因eta1和gapdh,再采用重叠延伸PCR将这两个基因融合,获得目的融合基因eta1-L-gapdh.将目的基因连接到表达载体pRI489的两个BamH Ⅰ酶切位点之间构建表达载体,用质粒提取、PCR、酶切、测序等手段对表达载体进行验证.验证正确的表达载体通过三亲接合转化野生鱼腥藻PC C7120,用新霉素抗性筛选出转基因藻落,通过质粒提取和PCR验证转基因藻.用RT-PCR和Western-blot分别从转录水平和翻译水平对转基因藻中融合基因的表达进行了检测.结果表明,含目的基因的表达载体构建成功,目的基因在蓝藻中转录并表达蛋白,该蛋白在蓝藻中的表达量为2.46％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王春梅	北京中医药大学生物制药系	58	259	10.0	13.0
2	张泽峰	北京中医药大学生物制药系	4	4	1.0	2.0
3	王智	北京中医药大学生物制药系	4	3	1.0	1.0
4	王晶晶	北京中医药大学生物制药系	4	6	2.0	2.0