检测单纯疱疹病毒2型的实时荧光定量聚合酶链反应方法的建立

• 作者: 张永乐 施新萍 李芳琼 潘克女 王伟 王海
• 来源期刊: 中国艾滋病性病
• 学科: 医学
• 关键词: 实时荧光定量聚合酶链反应 生殖器疱疹 疱疹病毒2型
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 工作研究
• 页码范围: 44-46,55
• 页数: 4页
• 分类号: R752.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13419/j.cnki.aids.2016.01.15

摘要

目的 建立实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)方法,检测单纯疱疹病毒2型(HSV-2).方法 根据基因库信息,以HSV-2的gG基因区为靶基因,设计合成引物和荧光探针.采用重组质粒构建标准品,优化反应体系进行方法学评价,同时对350例临床诊断HSV-2感染者和50例健康体检者的分泌物进行检测.结果 成功建立了TaqMan技术的real-time PCR方法.通过反应体系优化重复性良好,批内变异系数CV=2.56％,批间CV=5.15％.特异性高,对乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒及解脲支原体、沙眼衣原体阳性标本进行检测无特异性扩增,灵敏度达到500拷贝.从350例临床诊断HSV-2感染者的分泌物中,检出HSV-2 DNA 288例,检出率82.29％;50例健康体检者分泌物中未检出HSV-2 DNA.结论 real-time PCR方法能够快速、准确地检出HSV-2DNA,其特异性强、灵敏度高,可用于临床诊断HSV-2感染.