羟丙基-β-环糊精对新金色分枝杆菌合成ADD蛋白质组的影响

• 作者: 吴丹 张显 徐美娟 杨套伟 邵明龙 陈亚玲 饶志明
• 来源期刊: 应用与环境生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 植物甾醇 羟丙基-β-环糊精 新金色分枝杆菌 双向电泳 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1117-1121
• 页数: 5页
• 分类号: Q939.9|Q936
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1145.2016.01037

摘要

新金色分枝杆菌(Mycobacterium neoaurum JC-12)可降解植物甾醇合成药物中间体雄甾-1,4-二烯-3,17二酮(ADD),由于植物甾醇的溶解度较低,因此在转化体系中添加羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)作为助溶剂.本次研究在HP-β-CD存在与否条件下利用二维凝胶电泳(2-DE)和基质辅助激光解析电离飞行时间串联质谱技术(MALDI-TOFMS)分离和鉴定新金色分枝杆菌蛋白质表达量的差异;再使用反转录实时荧光定量PCR (RT-qPCR)对挑选出的5个与ADD合成相关的蛋白质编码基因进行转录水平分析.结果表明,2-DE图谱及质谱结果共鉴定到12个具有显著差异表达量的蛋白质点.其中,参与植物甾醇降解合成ADD途径的乙醇脱氢酶、烯酰-CoA水合酶、乙酰-CoA乙酰基转移酶、3α,7a,12α-三羟基-5β-胆甾-24-烯酰-CoA水合酶和4,5-9,10-双断裂-3-羟基-5,9,17三氧雄甾-1(10),2-二烯-4-酸酯水解酶的蛋白质表达量在羟丙基-β-环糊精存在条件下显著提高;参与糖、脂、氨基酸和核酸类物质代谢的乙二醛酶、3-氧代酰基-ACP合酶、3-酮脂酰-ACP还原酶、分支酸合酶、氮调节蛋白P-Ⅱ和DNA结合蛋白的蛋白质表达量也有一定的提高,但磷酸甘油酸变位酶的蛋白质表达量有所下降.通过RT-qPCR分-析的转录水平的变化情况与2-DE得到的蛋白水平的结果相符.综上所述,羟丙基-β-环糊精可促进降解植物甾醇合成ADD代谢途径及糖、脂、氨基酸和核酸类物质代谢途径相关酶的表达量.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	饶志明		107	599	12.0	20.0
2	徐美娟		51	125	6.0	9.0
3	吴丹		25	77	5.0	8.0
4	杨套伟		35	50	3.0	6.0
5	张显		42	98	6.0	9.0
6	邵明龙		7	6	1.0	2.0
7	陈亚玲		1	0	0.0	0.0