摘要:
目的:观察不同浓度复方青娥丸含药血清对去势鼠破骨细胞MMP3-OPN-P53通路蛋白表达及其凋亡的影响,探讨青娥丸抑制骨丢失的作用机制.方法:将20只SD大鼠去势饲养12周,处死选取股骨骨髓,进行体外OC培养.另用含2 g青娥丸生药的药液喂养20只SD大鼠,随机均分为空白对照(A)组(给纯化水1 mL),低浓度(B)组(给药0.5 mL),中浓度(C)组(给药1 mL),高浓度(D)组(给药2 mL),提取各组含药血清干预OC,运用图像系统测定TRAP阳性染色数目和骨磨片陷窝面积,流式细胞仪测定OC凋亡水平,RT-PCR法测定OC通路蛋白MMP3、OPN和P53的mRNA表达水平.结果:(1)术后12周模型组大鼠腰椎及股骨骨密度为(0.159±0.011)g·cm-2和(0.158±0.011)g·cm-2,假手术组为(0.330±0.012)g·cm-2和(0.298±0.016)g·Cm-2,2组有明显差异(P<0.05),表明大鼠骨质疏松的模型建立成功.(2)加入不同药物干预后,D组中MMP3含量明显低于其余各组(P<0.01),OPN和P53含量高于其余各组(P<0.05).B、C、D是随着含药血清依次增加的3组,MMP3表达依次减少,D组最少,而OPN和P53表达依次增加,其中D组在含药血清药物添加后明显增加,明显不同于A组(P<0.01).(3)空白对照组流式细胞仪检测无亚G1峰,G0~G1期细胞占23%.低浓度组、中浓度组和高浓度组流式细胞仪均检测在G1期前出一陡立的凋亡峰(亚G1峰),占细胞总数的38%,42%和58%.结论:研究发现青娥丸含药血清可以通过MMP3-OPN-P53信号通路激活OC凋亡,抑制骨丢失,改善骨代谢,防治绝经后骨质疏松症.