副溶血弧菌calR的基因敲除株与回补株构建

• 作者: 侯书宁 周冬生 孟彦言 张义全 张凌宇 朱文君 黄新祥
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 副溶血弧菌 calR 突变株 回补株
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 374-378
• 页数: 5页
• 分类号: Q933
• 字数: 3778字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2016.05.004

摘要

目的 构建副溶血弧菌calR的基因突变株和回补株,为研究CalR的功能奠定基础.方法 PCR扩增calR基因的同源臂融合片段,并直接克隆入自杀质粒pDS132中.通过接合转移的方式将重组自杀质粒转入副溶血弧菌RIMD2210633株(WT)中,利用同源重组的方法替换原始calR基因以构建calR无痕突变株(ΔcalR).PCR扩增calR的基因序列,并将其直接克隆入pBAD33质粒中,构建回补质粒.将回补质粒转入到ΔcalR中,即得回补株(ΔcalR/calR∷pBAD33).将vopN的启动子区克隆入pHRP309质粒的β-半乳糖苷酶基因上游,构建LacZ重组质粒,并将该重组质粒分别转入WT/pBAD33、ΔcalR/pBAD33和ΔcalR/calR∷pBAD33中,通过测定并比较3株菌中β-半乳糖苷酶活性的差异来判定CalR对vopN的调控关系.结果与结论 LacZ结果表明,CalR负调控vopN的转录,且回补株的回补效果良好,表明成功构建了副溶血弧菌calR基因的突变株和回补株,为后续对CalR的功能研究打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周冬生	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	36	288	10.0	15.0
2	黄新祥	江苏大学医学院	57	333	5.0	17.0
3	张义全	江苏大学医学院	9	17	3.0	3.0
7	侯书宁	江苏大学医学院	4	3	1.0	1.0
8	张凌宇	江苏大学医学院	2	3	1.0	1.0
9	孟彦言	江苏大学医学院	1	2	1.0	1.0
10	朱文君	江苏大学医学院	1	2	1.0	1.0