霍乱疫苗株溶血素hlyA基因敲除及绿色荧光蛋白构建

• 作者: 周妍妍 杨秋 芮勇宇 阚飙
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 关键词: 霍乱弧菌 减毒活疫苗 基因重组 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 362-366
• 页数: 5页
• 字数: 3977字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2016.03.007

摘要

目的：探讨霍乱疫苗株 NFYY101溶血素 hlyA 基因敲除及绿色荧光蛋白的构建。方法：将 hlyA基因上游片段（hlyAup）、hlyA 下游片段（hlyAdown），克隆入 pUC18中，再在两者间插入绿色荧光蛋白（lacz-GFPuv ）基因，获得重组质粒 pUC18-hlyAup-laczGFPuv-hlyAdown ，再构建重组自杀质粒 pCVD442-hlyAup-laczGFPuv-hlyAdown ，接合入霍乱疫苗株 NFYY101中，进行同源重组。结果：正确构建重组自杀质粒pCVD442-hlyAup-laczGFPuv-hlyAdown 表达绿色荧光蛋白，成功缺失了疫苗株候选株 NFYY101的 hlyA 基因，在敲除位置同源重组入绿色荧光蛋白基因并表达。结论：成功构建表达绿色荧光蛋白的重组自杀质粒，可用于O1群及O139群霍乱疫苗株hlyA基因敲除及绿色荧光蛋白构建。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	芮勇宇	南方医科大学南方医院检验医学科	118	541	11.0	13.0
2	阚飙	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	120	614	11.0	19.0
3	杨秋	南方医科大学南方医院检验医学科	4	18	2.0	4.0
4	周妍妍	南方医科大学南方医院检验医学科	2	4	2.0	2.0