S1PR3激动剂KRX-725促进细菌清除影响脓毒症小鼠预后

• 作者: 侯金超 张坚 徐孟龙 方向明
• 来源期刊: 中华急诊医学杂志
• 关键词: 脓毒症 1-磷酸鞘氨醇受体3 巨噬细胞 活性氧 细菌清除
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 57-62
• 页数: 6页
• 字数: 3675字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2016.01.013

摘要

目的 通过合成特异性S1PR3激动剂KRX-725,探讨S1PR3参与细菌清除的功能及其分子机制.方法 20只健康清洁级雄性C57BL/6小鼠以随机数字法分为S1PR3特异性激动剂KRX-725治疗组和对照组.采用大肠杆菌(3×106)腹腔注射诱导脓毒症模型,治疗组小鼠于模型后立即腹腔注射KRX-725(10 mg/kg),对照组给予等体积的溶剂,比较两组小鼠48 h生存率(n=12).模型后24 h检测腹腔及血液细菌负荷(n=5),并取肺组织进行苏木精-伊红染色(HE染色)评估KRX-725治疗组及对照组的肺脏病理损伤程度(n=3).体外采用大肠杆菌刺激腹腔巨噬细胞(细胞∶细菌=1∶10),分别加入KRX-725及其对照溶剂,采用CM-H2 DCFDA探针标记细胞内活性氧,酶标仪检测检测不同时间点巨噬细胞活性氧水平.庆大霉素保护实验观察KRX-725对巨噬细胞的清除细菌能力的影响.生存率分析采用Log-rank test,组间数据比较采用独立样本t检验分析,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 KRX-725治疗组脓毒症小鼠48 h生存率较对照组显著提高(P＜0.05).脓毒症模型后24 h,KRX-725治疗组较对照组血液及腹腔灌洗液中的细菌负荷显著降低(血液:t=3.17,P＜0.05;腹腔灌洗液:t=4.07,P＜0.01),同时KRX-725可显著降低脓毒症模型肺组织损伤程度(肺损伤评分:KRX-725组1.4 ±0.25,对照组2.4 ±0.25)(t=2.89,P＜0.05).体外实验,KRX-725治疗组较对照组可迅速上调大肠杆菌刺激后20 min及30 min细胞内活性氧的水平(20 min荧光强度:KRX-725组522.9±38.76,对照组385.9±15.90,P＜0.05;30min荧光强度:KRX-725组519.7 ±25.02,对照组384.5±15.28,P＜0.01).庆大霉素保护实验发现,KRX-725可显著降低细菌吞噬后3 h及6h巨噬细胞内存活的大肠杆菌的数量(3 h:KRX-725组286.5±98.35,对照组710.8 ±--107.8,P＜0.05;6 h:KRX-725组72.5±6.45,对照组205.8±66.76,P＜0.01).结论 体内应用KRX-725可改善脓毒症小鼠生存率,降低血液及腹腔细菌负荷,减轻肺脏损伤,从而改善脓毒症预后.体外KRX-725通过上调巨噬细胞活性氧的水平,提高巨噬细胞对清除细菌的能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	方向明	浙江大学医学院附属第一医院麻醉科	106	500	11.0	16.0
2	侯金超	浙江大学医学院附属第一医院麻醉科	8	18	3.0	4.0
3	张坚	浙江省医学会医学鉴定办公室	1	4	1.0	1.0
4	徐孟龙	浙江大学医学院附属第一医院麻醉科	1	4	1.0	1.0