HEK293T细胞表达的单核细胞趋化蛋白1促进巨噬细胞迁移

• 作者: 刘娟 刘晓渭 姜亚丽 王媛媛 秦鸿雁 赵俊龙 韩骅
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 巨噬细胞 单核细胞趋化蛋白1(MCP-1) 真核表达载体 载体构建
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 149-152
• 分类号: R392-33|R392.12
• 语种: 中文

摘要

目的 构建巨细胞病毒(CMV)启动子驱动的单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)真核表达载体,转染人胚肾HEK293T细胞,验证其对巨噬细胞的趋化作用.方法 小鼠基因组DNA作模板,用PCR法获得MCP-1启动子区基因片段,插入pFLAG-CMV1载体.用双酶切法和测序鉴定正确后,将构建好的病毒载体转染HEK293T细胞,用Western blot法检测MCP-1的表达,用TranswellTM实验检测转染后细胞分泌的MCP-1对巨噬细胞的趋化作用.结果 重组载体酶切鉴定在相应位置有目的片段,转染单核细胞趋化因子重组载体后的HEK293T细胞有MCP-1表达,转染后HEK293T细胞分泌的MCP-1明显增加巨噬细胞的迁移.结论 HEK293T细胞表达的MCP-1明显增强巨噬细胞的迁移.