ALK5激活型突变体在肾癌细胞中的表达及功能

• 作者: 李英杰
• 来源期刊: 现代肿瘤医学
• 学科: 医学
• 关键词: ALK5 TGF-β 定点突变
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1184-1187
• 页数: 4页
• 分类号: R737.11
• 字数: 2254字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4992.2016.08.004

摘要

目的:构建ALK5激活型真核表达质粒Flag-ALK5 T204D,证实融合蛋白在肾癌细胞内表达,并验证其对TGF-β信号通路的激活作用.方法:以野生型ALK5质粒为模板,采用重叠延伸PCR方法进行定点突变;将构建的重组质粒测序并转染到肾癌细胞ACHN中,提取细胞蛋白进行Western blot检测;利用双荧光素酶报告基因分析,检测该突变体对TGF-β信号通路典型靶基因启动子的激活作用.结果:对ALK5的表达序列进行定点突变,构建了ALK5激活型真核表达质粒Flag-ALK5 T204D;Western blot检测到融合蛋白的表达,分子量约为58kDa;Flag-ALK5 T204D能够上调TGF-β信号通路典型靶基因启动子活性.结论:成功构建了Flag-ALK5 T204D并验证了其对TGF-β信号通路的激活作用,为进一步研究ALK5的生物学特性及其功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李英杰	肥城矿业中心医院肾内科	2	3	1.0	1.0