猪繁殖与呼吸综合症病毒结构蛋白GP5-M腺病毒载体的构建及其在山羊乳腺中的表达

• 作者: 兰辉 刘军 华松 卓伟伟 权富生 罗艳
• 来源期刊: 西北农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合症 腺病毒载体 GP5-M蛋白 山羊乳腺
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 804-810
• 页数: 7页
• 分类号: S858.26
• 字数: 4972字
• 语种: 中文

摘要

猪繁殖与呼吸综合症(PRRS)是严重威胁养猪业的病毒性疾病,疫苗免疫是预防该病的最有效途径,PRRSV糖蛋白GP5和基质蛋白M融合后制成的基因工程疫苗能够有效激发机体产生免疫应答.通过在GP5和M基因的5 '端依次加上组氨酸标签序列、信号肽序列,利用Linker(GP)序列将GP5和M基因连接构建融合表达GP5和M蛋白的重组质粒pMD18T SignalP-His-GP5-M.以该质粒为模板,构建重组腺病毒载体并包装腺病毒.结果表明,用包装的腺病毒感染乳腺上皮细胞,测得最佳感染复数(MOI)为25,定量PCR和Western blot方法均检测到GP5M的表达.大量扩增腺病毒并使用不连续氯化铯浓度梯度离心纯化病毒,使用纯化的病毒灌注山羊乳腺,采用Western blot在收集的乳汁中也检测到GP5-M蛋白的表达.结果证实,利用腺病毒载体作为基因转导的媒介,在山羊乳腺中可以表达GP5-M融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	权富生	西北农林科技大学动物医学院	27	212	6.0	14.0
2	罗艳	西北农林科技大学动物医学院	13	117	6.0	10.0
3	刘军	西北农林科技大学动物医学院	69	1851	20.0	42.0
4	华松	西北农林科技大学动物医学院	22	69	5.0	7.0
5	卓伟伟	西北农林科技大学动物医学院	2	1	1.0	1.0
6	兰辉	西北农林科技大学动物医学院	1	1	1.0	1.0