条斑紫菜水通道蛋白PyAQP1基因的克隆及功能分析

• 作者: 孔凡娜 孙美娟 李娜 李超 杨俊卿 毕桂萁 茅云翔 赵海龙
• 来源期刊: 中国海洋大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 条斑紫菜 水通道蛋白 亚细胞定位 Real time-PCR 非生物胁迫
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 79-86
• 页数: 8页
• 分类号: Q945.78
• 字数: 7700字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16441/j.cnki.hdxb.20150425

摘要

本研究从条斑紫菜中克隆了一个水通道蛋白(Aquaporin,简称AQP)基因PyAQP,命名为PyAQP1(登录号为KT735045).序列分析表明,PyAQP1基因cDNA全长为1 151 bp,开放阅读框(ORF)为1 002 bp,编码333个氨基酸,含有200 bp的内含子.氨基酸序列比对分析表明,PyAQP1具有水通道蛋白的保守结构域NPA和6个跨膜区域.MEGA5.0构建的系统发生树表明,该基因属于Glps类.采用基因枪介导的洋葱瞬时表达定位结果显示,PyAQP1基因定位于细胞质膜上.运用实时荧光定量PCR技术对PyAQP1基因在干旱、盐度和温度处理条件下在转录水平进行分析.在干旱处理条件下,PyAQP1基因随着失水率的增加,表达量逐渐降低,失水率达到80％后复水处理,随着复水时间的延长,表达量增加.在山梨醇和盐度胁迫处理下,PyAQP1基因的表达趋势基本一致,随着盐度的增加,表达量降低.温度处理条件下,在-8℃时,基因的表达量显著增加,0℃时,基因的表达量略高于正常处理条件.当温度高于正常生长温度时,基因的表达量随着温度的升高,呈现逐渐升高的趋势.本研究为深入了解条斑紫菜逆境适应机制中水通道蛋白的作用奠定了基础,同时为后续条斑紫菜抗逆品系的选育提供了理论指导.