甲型H7N9流感病毒多重PCR-酶联免疫吸附检测方法的建立及应用

• 作者: 刘丹丹 宋勇春 焦永军 祁贤 章倩云
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 PCR-酶联免疫吸附试验 检测 分型
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1380-1383,1387
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

目的 建立一种快捷灵敏的禽流感病毒PCR-ELISA检测技术.方法 针对禽流感病毒M基因(M)、H7基因(H7)、N9基因(N9)3个基因片段的保守序列,通过生物素与地高辛的特异性标记,最后通过酶联免疫吸附反应判断PCR扩增的有无.结果 M、H7、N9 3个基因片段所能检测的最低拷贝数分别为1.43×103 copy/μl、1.04×102 copy/μl、8.80×103 copy/μl,其敏感度比普通PCR扩增提高了10倍～100倍,且不同流感病毒亚型之间、不同种属病毒之间均不存在交叉反应现象.另外还检测了114份临床标本,结果与鸡胚培养匹配率达100.0％.结论 本文通过特异性和敏感性实验显示此方法灵敏度高、特异性强,且操作简单,可以广泛地应用于流感病毒的实验室检测.