两种原代培养方法对血管平滑肌细胞收缩表型的影响

• 作者: 周昌钻 孟立平 季政 郭航远
• 来源期刊: 温州医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 血管平滑肌细胞 表型 细胞去分化 细胞分离 原代培养
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 页码范围: 859-864
• 页数: 6页
• 分类号: Q254|Q2-33
• 字数: 4319字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-9400.2016.12.001

摘要

目的：探究胶原酶消化法和植块法培养原代血管平滑肌细胞（VSMCs）对细胞收缩表型影响的特点。方法：使用II型胶原酶消化法和植块法分别离体培养原代VSMCs，并获取第1代、第2代、第4代、第8代、第12代VSMCs，Western blot检测不同代数表型标志蛋白α平滑肌肌动蛋白（SMA-α）、调宁蛋白（calponin）和骨桥蛋白（OPN）表达情况；随后检测不同培养方法间表型标志蛋白表达差异，并用划痕实验和MTT实验检测迁移、增殖水平，免疫荧光检测SMA-α胞内表达。结果：消化法最初可获得明显优于植块法的VSMCs收缩表型，表现为SMA-α和calponin高表达，OPN较低表达，增殖、迁移能力相对较弱。培养至第8代后，2种方法的细胞都发生显著的表型改变，增殖、迁移能力增强且消化法细胞呈现更强的去分化表型趋势。结论：II型胶原酶消化法可快速获得良好收缩表型的VSMCs，在第4代前具有优于植块法的收缩表型。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭航远	温州医科大学第一临床医学院	96	381	9.0	14.0
3	季政	绍兴市人民医院浙江大学绍兴医院心内科	10	28	4.0	5.0
4	周昌钻	温州医科大学第一临床医学院	7	24	3.0	4.0
5	孟立平	温州医科大学第一临床医学院	7	34	4.0	5.0