指状青霉cytb5和cytb5r基因克隆及与cyp51A的共表达

• 作者: 伍志 刘德立 牛玉慧 王胜强 秦婷婷 耿辉
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 指状青霉CYP51A 共表达 细胞色素b5 细胞色素b5还原酶 毕赤酵母X-33
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 179-188
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.09.024

摘要

为探究指状青霉细胞色素 b5（Cyt b5）与细胞色素 b5还原酶（Cyt b5r）在细胞色素 P450 CYP51A 电子传递方面的功用，研究了指状青霉 CYP51A 与 Cyt b5-Cyt b5r 共表达机制；并检测了其对于 cyp51A 基因表达水平的影响。通过转录组分析筛选并PCR 克隆获得了 cyt b5与 cyt b5r 基因，分别命名为 HS-Pdcyt b5和 HS-Pdcyt b5r。以多基因串联克隆载体 pPICZαA 为骨架构建了指状青霉共表达质粒 ppbrA（pPIC-Pdcyp51A-cyt b5-cyt b5r）；电转化法将重组质粒 ppbrA 导入毕赤酵母 X-33中。qRT-PCR 分析结果显示， CYP51A 与 Cyt b5-Cyt b5r 共表达后，其基因表达水平升高54%-97%，并维持较长时间（48-72 h）。表明 Cyt b5-Cyt b5r 系统可将电子高效转移给 CYP51A，从而增强 cyp51A 基因的转录表达。从指状青霉中克隆表达 HS-PdCyt b5和 HS-PdCyt b5r 蛋白，并通过共表达的方式研究 cyp51A 基因的功能尚为首次报道。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘德立		74	1006	18.0	29.0
2	秦婷婷	华中师范大学生命科学学院湖北省遗传调控与整合生物学重点实验室	4	16	2.0	4.0
3	耿辉	华中师范大学生命科学学院湖北省遗传调控与整合生物学重点实验室	6	5	1.0	2.0
4	王胜强	华中师范大学生命科学学院湖北省遗传调控与整合生物学重点实验室	2	3	1.0	1.0
5	牛玉慧	华中师范大学生命科学学院湖北省遗传调控与整合生物学重点实验室	1	0	0.0	0.0
6	伍志	华中师范大学生命科学学院湖北省遗传调控与整合生物学重点实验室	1	0	0.0	0.0