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摘要:
为了建立适合绣球的 SSR-PCR 反应体系,采用正交设计 L25(56)对影响 SSR-PCR 反应体系的5个主要因素(Mg2+、dNTPs、引物、DNA 模板和 Taq 聚合酶)在5个水平上进行优化,筛选出每个因素的最佳水平,建立适合绣球的SSR-PCR 反应体系。结果表明,20μL 的 SSR-PCR 反应体系中,DNA 模板用量为60 ng,Mg2+浓度为1.5 mmol /L, dNTPs 浓度为0.3 mmol /L,引物浓度为0.4μmol /L,Taq 聚合酶用量为0.8 U。扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,最佳温度退火40 s,72℃1 min,33个循环;72℃延伸10 min,4℃保存。选用10个绣球品种对建立的SSR-PCR 反应体系进行验证,结果表明该体系具有较好的稳定性和通用性。建立和优化的绣球 SSR-PCR 反应体系,为应用 SSR 分子标记技术开展绣球属植物遗传育种研究提供了理论依据和技术参考。
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文献信息
篇名 绣球 SSR-PCR 反应体系的建立与优化
来源期刊 华北农学报 学科 农学
关键词 绣球 SSR-PCR 正交设计 反应体系
年,卷(期) 2016,(4) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 68-73
页数 6页 分类号 S68.03
字数 4618字 语种 中文
DOI 10.7668/hbnxb.2016.04.012
五维指标
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研究主题发展历程
节点文献
绣球
SSR-PCR
正交设计
反应体系
研究起点
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相关学者/机构
期刊影响力
华北农学报
双月刊
1000-7091
13-1101/S
大16开
石家庄市和平西路598号
18-10
1986
chi
出版文献量(篇)
6276
总下载数(次)
4
总被引数(次)
88357
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