内含子方向对MAR表达载体重组CHO细胞转基因表达的调控作用

• 作者: 孙秋丽 李琴 王天云 王小引 赵春澎
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: 核基质结合区 内含子 转基因表达 CHO细胞
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 189-191,243
• 语种: 中文

摘要

目的 分析内含子方向对核基质结合区(matrix attachment region,MAR)表达载体在重组中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞中对转基因表达水平的影响.方法 PCR扩增β-珠蛋白MAR,克隆至表达载体上,构建含MAR表达载体,将载体上一段内含子序列酶切正向、反向连接到载体上.酶切和测序鉴定正确后,转染中国仓鼠卵巢CHO细胞,G418筛选稳定转化的细胞株,ELISA分析氯霉素乙酰转移酶(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)基因的表达水平.结果 具有正向内含子的含MAR和不含MAR的表达载体CAT基因表达水平均高于含反向内含子的表达载体(P＜0.05),反向内含子存在情况下,MAR不能提高转基因表达.结论 在重组CHO细胞中,内含子的方向影响转基因表达水平,正向内含子和MAR能提高转基因表达,反向内含子不能提高转基因表达水平.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王天云	新乡医学院生物化学与分子生物学教研室	76	498	10.0	20.0
2	王小引	新乡医学院生物化学与分子生物学教研室	60	386	12.0	16.0
3	李琴	新乡医学院分析测试实验室	17	68	5.0	7.0
4	赵春澎	新乡医学院生物化学与分子生物学教研室	26	125	4.0	10.0
5	孙秋丽	新乡医学院生物化学与分子生物学教研室	5	9	2.0	3.0