抗金黄色葡萄球菌单链抗体（scFv）的原核表达及蛋白纯化

• 作者: 徐永平 李媛 李晓宇 李晶泉 王丽丽 王熙涛
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 可溶性表达 包涵体 蛋白纯化 蛋白复性 有活性的蛋白
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 194-201
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.11.022

摘要

旨在将来源于鸡的金黄色葡萄球菌单链抗体（scFv）进行原核诱导表达，获得有抗体活性的目的蛋白。构建含有目的抗体基因的重组质粒，将此质粒进行原核诱导表达并鉴定所获得蛋白的生物活性。结果显示，（1）成功构建了含有金黄色葡萄球菌单链抗体（scFv）的重组质粒 pCold I-scFv，质粒成功转化到大肠杆菌表达菌株中；（2）经过诱导表达后，目的蛋白主要以包涵体的形式存在于沉淀中；（3）使用4 mol/L 尿素成功地将包涵体变性溶出；（4）通过柱层析法及透析法获得了纯化及复性效果较好的目的蛋白；（5）间接 ELISA 鉴定证实所获蛋白具有金黄色葡糖球菌抗体活性。通过质粒构建及原核诱导表达、包涵体溶出和复性等步骤，最终获得了有金黄色葡萄球菌抗体活性的目的蛋白。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐永平	大连理工大学生命科学与技术学院	77	698	14.0	22.0
3	王丽丽	大连理工大学生命科学与技术学院	76	426	12.0	18.0
9	李媛	大连理工大学生命科学与技术学院	8	56	3.0	7.0
10	李晶泉	大连理工大学生命科学与技术学院	2	2	1.0	1.0
11	王熙涛	大连理工大学生命科学与技术学院	3	22	2.0	3.0