DNA依赖性蛋白激酶催化亚基在电离辐射诱发HeLa细胞自噬中的作用

• 作者: 刘晓丹 周平坤 王豫 韩艳勤
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: DNA依赖性蛋白激酶催化亚基 电离辐射 HeLa细胞 细胞增殖 自噬 西罗莫司 哺乳动物西罗莫司靶蛋白( mTOR)
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 537-540
• 页数: 4页
• 分类号: R818.74
• 字数: 3365字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2016.07.001

摘要

目的：了解DNA依赖性蛋白激酶催化亚基（ DNA-PKcs）在电离辐射诱发细胞自噬中的作用。方法通过慢病毒载体（ pSicoR ）构建DNA-PKcs短发夹RNA （ shRNA ）表达载体，并转染HeLa细胞敲低DNA-PKcs表达。CCK-8实验检测细胞增殖活性及细胞放射敏感性，免疫印迹检测自噬相关蛋白表达，免疫荧光实验检测自噬标志物GFP-LC3的表达。结果成功构建shRNA敲低DNA-PKcs表达的HeLa细胞模型，通过该细胞模型观察到抑制DNA-PKcs蛋白表达导致细胞增殖能力降低、放射敏感性增高。 P62和LC3蛋白表达变化，以及细胞内绿色荧光蛋白（ GFP）-LC3免疫荧光斑检测结果显示，DNA-PKcs基因敲低后，明显增加X射线诱发细胞自噬。抑制DNA-PKcs导致哺乳动物西罗莫司（雷帕霉素）靶蛋白（ mTOR）第2481位丝氨酸磷酸化水平降低。结论抑制DNA-PKcs增强受照射宫颈癌HeLa细胞的自噬及放射敏感性，mTOR信号通路可能参与DNA-PKcs对自噬的调节作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周平坤	军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京市放射生物学重点实验室	108	511	11.0	16.0
2	刘晓丹	军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京市放射生物学重点实验室	32	118	5.0	10.0
3	王豫	军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京市放射生物学重点实验室	19	40	3.0	4.0
4	韩艳勤	军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京市放射生物学重点实验室	1	0	0.0	0.0