EB病毒编码miR-BART5作用于PUMA基因抑制肺癌细胞凋亡

• 作者: 姜波 张真铭 张芳芳 王玉明
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺癌 PUMA基因 miR-BART5 荧光素酶
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 临床实验研究
• 页码范围: 769-773
• 页数: 5页
• 分类号: R34
• 字数: 4672字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2016.10.16

摘要

目的 探讨肺癌组织中EB病毒(EBV)感染情况、EBV编码miR-BART5在肺癌组织中表达及对肺癌细胞凋亡的影响.方法 采用实时荧光定量PCR技术检测非小细胞肺癌组织和肺良性病变组织中EBV DNA载量及EBV编码miR-BART5的表达情况;在宣威肺腺癌细胞系中构建PUMA基因和miR-BART5表达载体,利用荧光素酶报告系统验证PUMA与miR-BART5关系.使用噻唑蓝比色法(MTT)分析转染后不同时间段细胞增殖情况.通过caspase3/7、9活性检测研究miR-BART5、PUMA基因在肺癌细胞凋亡中的作用.结果 30例肺癌组织中EBV DNA阳性11例(36.67％),30例肺良性病变组织中均阴性.miRNA-BART5在EBV阳性肺癌组织中表达量(3.46±0.54)明显高于EBV阴性肺癌组织(1.98±0.46)和EBV阴性肺良性病变组织(1.12±0.32),差异有统计学意义(P均＜0.05);EBV阴性肺癌组织与EBV阴性肺良性病变组织中miRNA-BART5表达差异无统计学意义(P＞0.05).荧光素酶报告基因分析显示,miR-BART5能够作用于PUMA基因3'UTR端.MTT结果显示,转染0、24、48、72 h后,miR-BART5组吸光度(A)值分别为0.8、0.93、1.18、1.2,细胞正常增殖;无意义序列(scrambled siRNA)转染组A值分别为0.71、0.80、0.90、0.99,生长未受到明显抑制;miR-BART5过表达(Over-miR-BART5)载体转染组A值为0.90、0.99、1.57、2.20,与miR-BART5组相比均增加;miR-BART5抑制表达(In-miR-BART5)载体转染组A值为0.70、0.67、0.56、0.48,与miR-BART5组相比,在转染24h后出现明显抑制,且随时间的推移,抑制程度越明显;miR-BART5过表达载体转染组中caspase3/7、9活性(3 646 ±334、5 533±112)相对于miR-BART5抑制表达载体转染组中caspase3/7、9活性(10 145±398、10 576±915)显著降低.结论 肺癌组织中EBV呈现较高的感染率;在EBV DNA阳性肺癌细胞中,miR-BART5可能通过抑制PUMA基因的表达进而抑制肺癌细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王玉明	昆明医科大学第二附属医院检验科	62	134	5.0	8.0
2	姜波	昆明医科大学第一附属医院检验科	6	9	2.0	2.0
3	张真铭	昆明医科大学第一附属医院检验科	4	4	2.0	2.0
4	张芳芳	昆明市盘龙区疾病预防控制中心检验科	1	2	1.0	1.0