RNA干扰技术沉默GP73对人肝癌HepG2细胞迁移和侵袭的影响

• 作者: 倪睿 张有成 徐小东 柳鹏程 王根年 赵坤 陈默 魏丰贤
• 来源期刊: 上海交通大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 高尔基体蛋白73 肝细胞癌 HepG2细胞 RNA干扰 迁移 侵袭
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1588-1593
• 页数: 6页
• 分类号: R735.7|Q279
• 字数: 5548字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2016.11.009

摘要

目的·探讨RNA干扰技术(RNAi)沉默人肝癌HepG2细胞中高尔基体蛋白73(GP73)基因表达后,对细胞迁移和侵袭能力的影响.方法·应用阳离子脂质体法将设计合成的GP73小干扰RNA (siRNA)瞬时转染HepG2细胞.HepG2细胞分为空白对照组、阴性对照组和GP73 siRNA干扰组.各组培养48 h后,采用实时定量PCR (qRT-PCR)和ELISA法检测转染后HepG2细胞中GP73 mRNA和蛋白表达水平变化,Transwell迁移实验、划痕愈合实验及侵袭实验分别观察迁移和侵袭能力改变,qRT-PCR和Western blotting法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9的表达情况.结果·GP73 siRNA能显著降低HepG2细胞中GP73 mRNA和蛋白的表达,转染后细胞的迁移和侵袭能力明显下降,其MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白表达水平均明显降低.结论·siRNA干扰介导GP73基因沉默可抑制人肝癌HepG2细胞的迁移和侵袭,其机制可能与下调MMP-2和MMP-9的表达水平有关.