转火龙果过氧化氢酶基因烟草植株的获得及其抗旱性分析

• 作者: 乔光 吴艳 张婷 文晓鹏 聂琼 葛菲
• 来源期刊: 西南大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 火龙果 CAT基因 植物表达载体 遗传转化 烟草 基因表达
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 57-63
• 分类号: Q291|Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.13718/j.cnki.xdzk.2016.11.009

摘要

根据前期克隆的火龙果过氧化氢酶基因(HuCAT)设计特异引物,从克隆载体PMD18T-HuCAT中扩增出特异带,将其连入植物表达载体pSH737,构建了CaMV35s启动子驱动的表达载体pSH737-HuCAT;采用农杆菌介导法转化烟草,获得37个抗性植株,经GUS组织化学染色及PCR扩增鉴定,有29个株系为转基因植株;经半定量RT-PCR及荧光定量PCR检测,筛选出高表达株系22个;以PEG-6000溶液模拟干旱胁迫条件,测定转基因烟草的抗旱相关生理指标,结果显示,转基因烟草CAT活性、SOD活性、POD活性、PRO含量和相对含水量均高于野生型烟草,MDA含量低于野生型烟草,表明转HuCAT基因可能提高了烟草的抗旱性.