猪伪狂犬病毒gD蛋白抗原表位的克隆及表达

• 作者: 刘芳 张冲 李学伍 王寅彪 赵朴 邓瑞广
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪伪狂犬病病毒 gD基因 抗原表位 蛋白质表达
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 122-125
• 页数: 4页
• 分类号: S855.3
• 字数: 3652字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2016.04.027

摘要

依据GenBank中猪伪狂犬病毒(PRV)BJ/YT株gD基因设计引物,扩增gD蛋白抗原表位,其设计扩增长度为702 bp,将扩增片段克隆到pMD19-T载体获得pMD19-T-gD.利用BamHⅠ和HindⅢ限制性内切酶双酶切pMD19-T-gD质粒,进行琼脂糖凝胶电泳并回收酶切片段,将回收片段与原核表达载体pET-28 a连接,成功构建了pET-28 a-gD表达载体.将表达载体转化感受态细胞Rosetta,IPTG诱导表达后,进行SDS–PAGE电泳,结果显示,在25 ku处出现特异性蛋白质条带.Western blot分析结果表明,表达产物能够被PRV的阳性血清识别.综上,成功克隆并表达了gD蛋白抗原表位,且其表达产物具有较好的生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘芳	河南科技大学动物科技学院	5	11	2.0	3.0