高表达ITGB1促进人乳腺上皮MCF10A细胞EMT及迁移

• 作者: 周明莉 文思阳 杜燕娥 杨佳佳 柳满然 郎磊
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: ITGB1 上皮间质转换 细胞迁移 细胞侵袭
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1511-1516
• 页数: 6页
• 分类号: R737.9|R34|R73-37
• 字数: 2712字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨ITGB1基因过表达对人乳腺上皮MCF10A细胞迁移和侵袭的影响.方法 构建重组质粒pBABEpuro-myc-ITGB1,在人胚肾上皮细胞系293T细胞中包装反转录病毒,转染人乳腺上皮MCF10A细胞系,构建ITGB1基因过表达的稳定细胞系;实验设空白对照组(MCF10A)、阴性对照组(MCF10A-vector)和ITGB1基因过表达组(MCF10A-ITGB1);经嘌呤霉素筛选后,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测ITGB1 mRNA及蛋白的表达;Tran-swell迁移和侵袭实验分别检测细胞株迁移和侵袭能力;蛋白质印迹法进一步检测上皮间质转换(EMT)相关蛋白E-cadhefin、vimentin、fibronectin、N-cadherin以及ITGB1下游ILK、p-FAK和FAK蛋白的表达.结果 成功构建ITGB1基因稳定过表达人乳腺上皮MCF10A细胞系;ITGB1基因过表达组(MCF10A-ITGB1)与空白对照组(MCF10A)和阴性对照组(MCF10A-vector)细胞相比,迁移能力(P＜0.05)和侵袭能力(P＜0.01)显著增强;EMT相关蛋白E-cadherin显著下调(P＜0.05),vimentin、fibronectin、N-cadherin以及ITGB1下游ILK,p-FAK蛋白显著上调(P＜0.05).结论 在人乳腺上皮MCF10A细胞中,过表达ITGB1基因诱导细胞EMT并促进其迁移和侵袭.