腺病毒介导PKM2 RNAi对MCF7细胞影响的研究

• 作者: 侯志平 王润秀 谢富华
• 来源期刊: 中华肿瘤防治杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 重组腺病毒 PKM2 RNAi MCF7
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究/论著
• 页码范围: 283-287
• 分类号: R73.3
• 语种: 中文

摘要

目的 丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)是糖酵解的关键酶之一,其M2型同工酶(PKM2)高表达于乳腺癌等肿瘤中.本研究探讨PKM2 RNAi对乳腺癌细胞MCF7系增殖、ATP产生、侵袭和细胞粘附能力的影响及其可能机制.方法 通过介导PKM2 shRNA构建重组腺病毒Ad-PKM2,用以感染人乳腺癌细胞系MCF7.病毒感染细胞24和48h后,收集细胞总蛋白行免疫印迹实验检测基因沉默的效果,CCK-8实验检测细胞增殖和粘附能力,Transwell实验检测细胞穿透人工基底膜能力,采用JC-1探针观察细胞线粒体活性并用试剂盒检测细胞ATP含量.结果 免疫印迹结果表明,腺病毒成功介导MCF7细胞发生PKM2 RNAi.病毒感染后细胞的增殖能力被抑制41.0％,P＜0.05.穿过人工基底膜的细胞减少50.2％;细胞的粘附能力下降34.7％,P＜0.05;细胞内的ATP含量从正常的90 μmol/L下降至68.3μmol/L(P＜0.05),而细胞线粒体活性并未受明显影响.结论 在乳腺癌MCF7细胞中,抑制PKM2蛋白的表达可有效抑制细胞的增殖、侵袭和粘附能力,其机制可能是减少了细胞的ATP能量供应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王润秀	赣南医学院第一附属医院肾内科	26	55	4.0	6.0
2	谢富华	赣南医学院分析与检测实验教学中心	25	34	3.0	4.0
3	侯志平	赣南医学院分析与检测实验教学中心	4	1	1.0	1.0