针对 PKM2多位点 RNAi 质粒载体的构建和筛选

• 作者: 刘金英 吴小云 王润秀 谢富华 钟悦
• 来源期刊: 赣南医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: M2 型丙酮酸激酶 RNA 干扰 小发夹 RNA 乳腺癌
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 325-328,353
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3183字
• 语种: 中文

摘要

目的：构建针对 M2型丙酮酸激酶（ PKM2）基因3个可干扰序列设计小发夹 RNA（small hairpin RNA， shRNA）载体，为下一步探索 Ad-PKM2介导 PKM2 RNAi 对乳腺癌细胞作用及机制建立基础。方法：根据 RNAi 设计软件设计并合成3对 shRNA 模板序列，依次将它们克隆至 pGenesil 载体中构建重组质粒，通过 MTT 检测筛选出对乳腺癌细胞株 MCF-7增殖效应影响最强的 RNAi 序列。结果：酶切鉴定和测序结果证实 RNAi 载体构建成功，均能高效感染 MCF-7并抑制 MCF-7细胞的增殖，pGenesil-PKM2-（1+2+3）的抑制能力最强。结论：针对PKM2多靶点 RNAi 载体成功构建，为下一步研究 PKM2被沉默后细胞生物学行为的变化打下基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王润秀	赣南医学院第一附属医院肾内科	26	55	4.0	6.0
2	谢富华	赣南医学院分析与检测实验教学中心	25	34	3.0	4.0
3	吴小云	赣南医学院生物化学与分子生物学教研室	16	55	4.0	6.0
4	刘金英	赣南医学院分析与检测实验教学中心	23	1	1.0	1.0
5	钟悦	赣南医学院分析与检测实验教学中心	6	3	1.0	1.0