人PKM2基因克隆、表达及纯化的研究

• 作者: 刘会玲 李海红 王千千 王海琳 王秋香 祝秉东
• 来源期刊: 实用妇产科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: PKM2 克隆 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 论著与临床
• 页码范围: 270-273
• 页数: 4页
• 分类号: R737.33
• 字数: 3392字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建人PKM2(M2-type pyruvate kinase)的原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达,镍离子柱亲和层析法纯化融合蛋白.方法:用PCR方法从宫颈癌Hela细胞全基因组中扩增出目的基因PKM2,通过克隆载体pET30a(+)构建质粒载体pET30a(+)-PKM2.经双酶切和DNA测序证实正确后,用Ni-NTA亲和层析柱进行纯化.结果:双酶切鉴定所切下的片段大小与理论值相符,测序结果和报道一致.经SDS-PAGE分析,纯化后的蛋白约在58 KDa位,条带单一,无杂带出现.结论:成功表达纯化了PKM2融合蛋白,为肿瘤疫苗研制和肿瘤标志物快速诊断的研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘会玲		23	48	4.0	5.0
2	祝秉东	兰州大学结核病研究中心	28	121	7.0	9.0
3	王海琳		48	206	7.0	12.0
4	王千千	兰州大学第一临床医学院	4	7	1.0	2.0
5	李海红	兰州大学第一临床医学院	2	0	0.0	0.0
6	王秋香	兰州大学第一临床医学院	2	0	0.0	0.0