负载肺癌干细胞膜微粒的 DC －CIK 对耐药肺癌细胞的靶向杀伤作用及对肺癌干细胞凋亡的影响

• 作者: 刘征丽 刘文超 唐兴宇 孙建中 庞翠 张菊 段琼 王金燕 苏海川
• 来源期刊: 现代肿瘤医学
• 学科: 医学
• 关键词: 树突状细胞 细胞因子诱导的杀伤细胞 膜微粒 EGFR -TKI 耐药 肺癌干细胞
• 年，卷（期）: 2016,（15）
• 所属期刊栏目: 论 著 -- 基础研究
• 页码范围: 2337-2342
• 页数: 6页
• 分类号: R734.2
• 字数: 7919字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4992.2016.15.001

摘要

目的：探讨负载肺癌干细胞膜微粒的 DC －CIK 细胞对 EGFR －TKI 耐药肺癌细胞的杀伤作用及对肺癌干细胞凋亡的影响机制。方法：无血清悬浮细胞培养法富集 EGFR －TKI 耐药肺癌细胞 A549、H292干细胞样细胞，RT －PCR 检测干细胞标志物，裸鼠成瘤实验鉴定致瘤性。超滤和差速离心法获取肺癌干细胞膜微粒。流式细胞术分别测定共孵育组和常规培养组 DC 成熟标志 CD86和 CD83，测定两组 DC －CIK 细胞表型CD3＋、CD3＋CD8＋、CD3＋CD56＋、CD3＋CD4＋；形态观察及 MTT 法分别测定不同效靶比两组 DC －CIK 对A549、H292的杀伤效应；ELISA 法分别检测两组 DC －CIK 上清中 IL －2、IFN －γ、TNF －α分泌水平；流式细胞术分别测定两组 DC －CIK 对肺癌干细胞凋亡的影响。结果：富集培养获得的 EGFR －TKI 耐药肺癌干细胞样细胞高表达干细胞标志物 Sox2和 Oct4，并具较强裸鼠致瘤性。负载膜微粒的 DC 成熟标志 CD86和 CD83较常规 DC 表达显著升高；负载膜微粒的 DC －CIK 较常规 DC －CIK 细胞表型 CD3＋、CD3＋CD8＋、CD3＋CD56＋、CD3＋CD4＋升高，对 EGFR －TKI 耐药肺癌细胞杀伤效应高于常规 DC －CIK，并具有显著提高的靶向趋向性；负载膜微粒的 DC －CIK 分泌因子对 EGFR －TKI 耐药肺癌干细胞样细胞凋亡的影响与常规 DC －CIK 不同。结论：与常规培养 DC －CIK 相比，负载膜微粒的 DC －CIK 活性提高，对 EGFR －TKI 耐药肺癌细胞的体外特异靶向杀伤效应显著提高。细胞分泌因子可显著上调耐药肺癌干细胞的细胞凋亡率。