丙酮醛降解酶基因的克隆与高效表达

• 作者: 王平 赵巧巧 黄鹰
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 粟酒裂殖酵母 丙酮醛降解酶 丙酮醛 基因克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 62-65
• 页数: 4页
• 分类号: Q785
• 字数: 831字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2016.02.017

摘要

由于丙酮醛降解酶（methylglyoxal degradation enzyme，MD）是生物体内代谢丙酮醛的一种关键酶，实现MD的高效表达对调控丙酮醛的代谢途径具有重要意义。所以根据Schizosaccharomyces pombe＿GeneDB中MD的基因序列（SPAC22E12．03C）设计引物，以粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe ）cDNA文库为模板通过PCR扩增技术得到目标基因，目的片段全长576 bp。将 SPAC22E12．03C 连接到 pET －28a（＋）上，得到重组质粒 pET －28a（＋）－SPAC22E12．03C，并在Escherichia coli BL2l（DE3）中实现表达。同时，对其目的蛋白的表达条件进行了优化，获得最佳表达条件：诱导温度37℃，诱导起始菌体D600 nm为0．5～0．6，诱导剂IPTG浓度为0．8 mmol／L。这为研究粟酒裂殖酵母体内丙酮醛的降解途径打下了坚实基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄鹰	南京师范大学生命科学学院	13	40	3.0	6.0
2	王平	南京师范大学生命科学学院	44	222	8.0	14.0
3	赵巧巧	南京师范大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0