PI3K/Akt信号通路在转录水平调控VCAM-1表达

• 作者: 史家欣 李小民 贾圣男 陈晓兵
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: PI3K/Akt信号通路 脂多糖 人脐静脉血管内皮细胞 血管细胞黏附分子
• 年，卷（期）: 2016,（29）
• 所属期刊栏目: 论著·基础研究
• 页码范围: 4036-4040
• 页数: 5页
• 分类号: R392.6
• 字数: 4891字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2016.29.002

摘要

目的 探讨PI3K/Akt信号通路是否调控脂多糖诱导的人内皮细胞VCAM-1表达及机制.方法 脂多糖(LPS) 10μg/mL刺激人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)0、6、12、24 h,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测VCAM-1蛋白表达,刺激0、4、8、12 h行RT-PCR检测VCAM-1 mRNA;LPS(10μg/mL,后同)刺激HUVEC 0、30、60、120 min后,Western blot检测PI3K(磷脂酰肌醇-3激酶)、磷酸化PI3K (p-PI3K)、Akt、磷酸化Akt (p-Akt)表达;PI3K抑制剂LY294002(10、50 μmol/L)、Akt抑制剂A6730(2、10 μmol/L)预处理细胞1h后LPS刺激12 h,Western blot检测VCAM-1蛋白表达,刺激8h行RT-PCR检测VCAM-1 mRNA;加或不加抑制剂,LPS刺激8h加入放线菌素D抑制转录,于0、1、2、3、4h收细胞行RT-PCR检测VCAM-1 mRNA,计算mRNA半衰期.结果 LPS刺激HUVEC(6、12、24 h)后VCAM-1蛋白表达增加(P＜0.05),12h达峰值,VCAM-1 mRNA在刺激后也增加(P＜0.05),8h达峰值;LPS刺激HUVEC后p-PI3K、p-Akt增加,p-PI3K在刺激30 min达峰值(P＜0.05),以后逐渐下降,120 min与0h接近(P＞0.05),p-Akt在刺激30 min明显增加,60 min达峰值,120 min仍高于0 h(P＜0.05);LY294002下调了p-Akt表达(P＜0.05),同时降低VCAM-1蛋白、mRNA合成(P＜0.05);Akt抑制剂也抑制VCAM-1蛋白、mRNA(P＜0.05);PI3K、Akt抑制剂均不影响VCAM-1 mRNA稳定性(P＞0.05).结论 PI3K/Akt信号途径在转录水平调控VCAM-1表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李小民	徐州医学院附属连云港医院急诊内科	18	63	5.0	7.0
2	陈晓兵	徐州医学院附属连云港医院急诊内科	11	67	5.0	8.0
3	贾圣男	徐州医学院附属连云港医院急诊内科	2	8	2.0	2.0
4	史家欣	徐州医学院附属连云港医院呼吸内科	1	6	1.0	1.0