Npas4基因过表达慢病毒的构建及其在SK-N-SH细胞的表达

• 作者: 孙钦儒 苏倩 贾宁
• 来源期刊: 科学技术与工程
• 学科: 生物学
• 关键词: Npas4基因 过表达 慢病毒载体 SK-N-SH细胞
• 年，卷（期）: 2016,（18）
• 所属期刊栏目: 研究简报 -- 生物科学
• 页码范围: 143-146
• 页数: 4页
• 分类号: Q789
• 字数: 2749字
• 语种: 中文

摘要

研究旨在构建Npas4基因过表达慢病毒,为进一步深入探索Npas4基因的功能奠定基础。用人工合成大鼠Npas4基因cDNA片段,将其插入pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP构建慢病毒表达质粒pCDH-Npas4。酶切、测序验证质粒后,将pCDH-Npas4和辅助质粒共转染包装细胞293T,浓缩上清得病毒颗粒并测定病毒滴度。取病毒颗粒感染SK-N-SH细胞48 h,收集细胞采用Western blotting法检测Npas4蛋白的表达。 pCDH-Npas4携载正确Npas4基因,将其包装293T细胞后能产生病毒。病毒滴度为1．05×109 TU/mL。相比于转染GFP病毒对照组(GFP)和未转染对照组(control),Npas4重组慢病毒组(Npas4)的细胞Npas4蛋白表达显著增高。成功构建Npas4基因过表达的重组慢病毒载体pCDH-Npas4,并获得高效的重组慢病毒,能将外源Npas4基因导入SK-N-SH细胞,为进一步研究Npas4基因的相关功能奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾宁	西安交通大学医学部基础医学院人体解剖与组织胚胎学系	9	22	3.0	4.0
2	孙钦儒	西安交通大学医学部法医学院法医物证学系	5	8	2.0	2.0
3	苏倩	西安交通大学医学部第一附属医院新生儿科	2	3	1.0	1.0