牛羊肝片吸虫病实时荧光PCR检测方法的建立

• 作者: 吴绍强 徐赓 林祥梅 王彩霞
• 来源期刊: 检验检疫学刊
• 学科: 生物学
• 关键词: 肝片吸虫 实时荧光PCR 敏感性 特异性 检测
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: Q789

摘要

选择肝片吸虫保守的核糖体DNA ITS-2区域设计引物和TaqMan探针,通过对反应体系和反应条件进行优化,建立了实时荧光定量PCR检测肝片吸虫的方法。所构建方法检测质粒模板DNA的动态范围为1×10~0-1×10~6拷贝,敏感度可检测到1拷贝质粒DNA,而且与华支睾吸虫、姜片吸虫、卫氏并殖吸虫无交叉反应,特异性良好。以所建立的方法检测虫卵可以检测到2个肝片吸虫卵囊。结果表明,本研究所构建的牛羊肝片吸虫病实时荧光PCR检测方法具有快速、灵敏和特异等优点,可满足养殖场和口岸牛羊及其肉制品肝片吸虫的检测需要。