新型慢病毒转染四种细胞及在体内示踪的研究

• 作者: 刘菊芬 庞荣清 李自安 潘兴华 王金祥 阮光萍
• 来源期刊: 中华细胞与干细胞杂志（电子版）
• 关键词: 绿色荧光蛋白质类 慢病毒属 转染 骨髓 间质干细胞 荧光抗体技术
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 189-194
• 页数: 6页
• 字数: 3693字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.2095-1221.2017.04.001

摘要

目的 探讨最佳的生物标记方法示踪细胞,更好地观察细胞移植后在体内的归巢情况.方法 本实验室用一种新型慢病毒(eGFP+PURO Lentivirus)转染了四种细胞,确定了四种细胞的最佳感染复数,细胞转染成功后,用最佳浓度的嘌呤霉素筛选,获得四种稳定的GFP阳性表达细胞株.所用的细胞包括人脐带间充质干细胞(hUC-MSC),树鼩脐带间充质干细胞(TS-UC-MSC),人胚肾细胞(293T),C57BL小鼠骨髓间充质干细胞(C57-BMSC).结果 用新型慢病毒(eGFP+PURO Lentivirus)成功转染四种常用细胞,转染成功率100％,细胞成功标记上GFP荧光,并确定了最佳的嘌呤霉素使用浓度,确定了不同细胞的感染复数.最终确定TS-UC-MSC的最佳感染复数为240,hUC-MSC的最佳感染复数为150,293T的最佳感染复数为100,C57-BMSC的最佳感染复数为50.用带荧光的C57-BMSC细胞回输C57BL小鼠体内,冰冻切片在肝中找到标记细胞,在脾、肺、肾、心未找到标记细胞,说明外来细胞主要在肝脏中代谢.结论 在细胞移植治疗时,细胞成功标记上GFP能在动物体内进行示踪,良好的细胞示踪方法可以很好地反映所研究细胞在体内外的动向.