A型产气荚膜梭菌噬菌体裂解酶Cp51的原核表达及活性检测

• 作者: 吕梦娜 唐陶 林瑞庆 王丽梅 陈冰冰 龙航宇
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 产气荚膜梭菌 噬菌体 裂解酶 蛋白表达 杀菌活性
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 页码范围: 19-23
• 页数: 5页
• 分类号: Q939.48|S945.1
• 字数: 4343字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2017.05.004

摘要

[目的]原核表达A型产气荚膜梭菌噬菌体裂解酶Cp51并研究其对A型产气荚膜梭菌Clostridium perfringens的体外抗菌活性.[方法]合成噬菌体裂解酶Cp51基因,并构建了pET-32a-Cp51原核表达载体,转化到大肠埃希菌Escherichia coli BL21 (DE3),经终浓度为0.5 mmol·L-1的IPTG诱导以及镍柱纯化后,获得了可溶性的Cp51重组蛋白;用比浊法检测Cp51重组蛋白的杀菌活性.[结果]噬菌体裂解酶Cp51重组蛋白能够有效降低7株A型产气荚膜梭菌的浊度,裂解酶质量浓度在5 μg·mL-1以上、作用30 min对A型产气荚膜梭菌的杀菌率可达到99.99％以上,而对其他种类细菌无杀菌效果.[结论]A型产气荚膜梭菌噬菌体裂解酶Cp51重组蛋白对A型产气荚膜梭菌有较强的体外杀菌活性和特异性,研究结果为后续裂解酶Cp51的临床应用奠定基础.