荧光假单胞菌GcM5-1A溶血素的基因克隆及其活性研究

• 作者: 刘飞 张倩倩 李荣贵 王林松
• 来源期刊: 青岛大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 荧光假单胞菌 松材线虫 溶血素 克隆 活性
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 物理与生物
• 页码范围: 46-50
• 页数: 5页
• 分类号: S763.13
• 字数: 2813字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-1037.2017.02.10

摘要

利用基因克隆技术探究了松材线虫携带的荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)GcM5-1A是否含有溶血素基因以及溶血素活性.根据荧光假单胞菌疑似溶血素的基因序列设计一对引物,通过PCR技术扩增得到疑似溶血素基因Hly.将该基因克隆到表达载体pET-15b上,构建了pET-15b-Hly.重组质粒pET-15b-Hly转化E.coli BL21(DE3)构建了工程菌,工程菌经过异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,SDS-PAGE分析表明,疑似溶血素在大肠杆菌中得到了表达.利用Ni-Sepharose 6(FF)亲和树脂纯化了重组蛋白,溶血实验显示,纯化的重组蛋白可使鸡的红细胞发生溶血,证实本研究所克隆基因确实编码溶血素,利用黑松切根苗的生测表明,重组荧光假单胞菌溶血素对黑松幼苗有致萎活性,这为深入研究松材线虫携带细菌在松材线虫病病理进程中的作用打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李荣贵	青岛大学生命科学学院	68	702	13.0	25.0
2	刘飞	青岛大学生命科学学院	4	4	1.0	1.0
3	王林松	青岛大学生命科学学院	4	2	1.0	1.0
4	张倩倩	青岛大学生命科学学院	5	11	2.0	3.0